博雅年级高二下暑假作业

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一氧化氮(NO)可修复肿瘤异常血管、增强免疫细胞功能,但机体无法在肿瘤部位合成足量NO。肿瘤内部为缺氧环境,科研人员选用安全无毒、可特异性富集在肿瘤缺氧区的大肠杆菌Nissle1917(EcN)为受体菌(该菌无法合成NO),通过基因工程将一氧化氮合酶(BsNOS)基因组装到质粒上,构建重组表达载体,从而获得可在肿瘤内定向合成NO的工程菌,部分操作过程如图所示,限制酶及其切割序列如表所示。回答下列问题: (1)从枯草芽孢杆菌中获取BsNOS基因,通过PCR技术进行扩增,依据的原理是____。PCR反应体系中的模板、引物、原料,随着循环次数的增加,含量逐渐减少的物质为____。 (2)为实现BsNOS基因正确且高效地插入质粒,应选择限制酶____切割质粒;已知BsNOS基因转录的模板链两端的碱基序列为5'-ATCTCG……BsNOS基因……CGATGA-3',为扩增目的基因并成功完成重组质粒的构建,请设计BsNOS基因的引物1的5'端的12个碱基序列:5'-____-3'。 (3)某同学认为:将转化后的菌液涂布在添加X-gal的固体培养基上,筛选出的白色菌落即导入了重组质粒的工程菌。你认为该说法是否正确?请作出判断并说明理由:____。 (4)筛选出的工程菌仅能在肿瘤部位合成NO,在正常组织中无法合成,从转录调控角度分析,原因是____。 (含图)(含图)